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Appendice

Le système suivant Laemmli est légèrement

modiﬁé pour une utilisation avec les unités de

mini-verticales. Le système de Laemmli est le

protocole le plus courant pour électrophorèse

SDS-dénaturées protéines. L'ion conduisant dans

ce système tampon discontinue est le chlorure et

l'ion de fuite est la glycine. Par conséquent, le gel

de résolution et le gel d'empilement contiennent

Tris-Cl tampons (de la concentration différente

et pH), et le tampon d'électrophorèse contient

du Tris-glycine. Tous les tampons contiennent

0,1% de SDS.

Composition de gel de polyacrylamide est

indiqué par deux pourcentages différents:

% T = total acrylamide = g (acryl + bis) × 100

100 mL

% C = crosslinker = g (bis) × 100

g (acryl + bis)

Le pour cent total de l'acrylamide (% T) dans le

gel de séparation, qui peut varier de 5 à 20%,

détermine la taille des pores. Couramment, la

quantité de réticulant utilisé (% C) est de 2,6%.

Dans le système exemple suivant, la composition

de gel de résolution est de 10% T, 2,6% de C,

qui se traduit par une taille de pore moyenne.

La composition de gel d'empilement est T

4%, 2,6% C. Le T% dans le gel d'empilement

est inférieur à cause une taille plus grande est

requise des pores.

•

p17

SE250 résultats:

Piste 1: SDS-6H, haute MW

mélange type, Sigma™

Voie 2: SDS-7 Dalton Mark

VII-L™, Sigma (10 pi par voie)

Gel

12% Vitrail SDS-PAGE au bleu

de Coomassie

Conditions de fonctionnement

20 mA, à une heure

1 2 ... 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31

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