mu PR645-IM/Italian/Rev.B0/08-12ImmunoBlot e ImmunoBlot XLIstruzioni per l’usoman uale utenteItaliano
• p8Perdite – soluzione di anticorpi si è spostata ai canali adiacenti.Zone aride della membrana agiscono come stoppini per fluidi dalle aree adiacent
• p9 problema possibili cause raccomandazioniBolle (Nota: Piccole bolle in genere muovono quando l’unità è scosso e di solito non influisce sui risul
• p10Appendice A: note tecnicheNota 1: Blocco della membranaLe membrane devono sempre essere bloccato prima di montare in ImmunoBlot. Si prega di segu
• p11Nota 2: Allineare la membranaPer esperimenti di Western blotting è importante che le corsie e bande di proteine sulla membrana allineati con i
• p12Fig C. 25-ben 1,0 mm pettine (PR511-25-1.0) allinea anche con i canali 25 del ImmunoBlot e può essere usato per sondare 25 campioni con una sonda
• p13Passo 2.Dopo che i gel sono cancellati, le bande sulla membrana non sono visibili. Aggiunta di un colorante reattivo non renderà facile allineare
• p14Nota 3. Eliminare le bollePiccole bolle nei canali generalmente non influ-enzare la reazione finale, e dovrebbe muoversi avanti e indietro sulla su
• p15Nota 5. Montaggio delle O-ring nelle scanalatureSe i molteplici unità di lavaggio non si adattano con facilità nelle fessure, applicare una picc
• p16Appendice B: rilevamento utilizzando ECL sistemi occidentali di rilevamento blottingHoefer raccomanda di eseguire l’etichettatura e la rilevazion
• p176Brevemente sciacquare la membrana con due cambi di tampone di lavaggio seguita da 4 lavaggi più in PBS-T (4 × 5 min a dondolo).7Detection soluzi
• piIndice Introduzione ...1Disimballaggio e inventario ...2Istru
• p18Informazioni per l’ordine prodotto quantità codiceImmunoBlot, per l’uso con gel di dimensioni standard 1 PR625di membrana (ad esempio SE600
Hoefer, Inc. 84 October Hill Road Holliston, MA 01746Numero verde: 1-800-227-4750 Telefono: 1-508-893-8999 Fax: 1-508-893-0176 E-mail: support@hoeferi
IntroduzioneTrasferimento delle proteine o acidi nucleici, frazionato mediante gel elettroforesi, ad una superficie della membrana immobilizzazione a
• p2Esistono 2 principali applicazioni per la ImmunoBlot e ImmunoBlot XL:Antisieri multipla o sonde possono essere testati contro un unico campione d
• p3IstruzioniIl dettaglio di seguito i passaggi per sondare una membrana utilizzando il ImmunoBlot.Selezionare e bloccare membrana1Seleziona una memb
• p4Aspirare e introdurre soluzioni di anticorpi1Aspirare il liquido in eccesso dai canali attraverso i fori numerati.Nota: per evitare l’essiccament
• p5Rimuovere soluzioni anticorpo primario e lavare la macchiaUtilizzare il collettore di lavaggio per rimuovere la soluzione di anticorpi e lavare il
• p6Introdurre anticorpo secondario e incubareL’incubazione anticorpo secondario può essere eseguita in unità o in un vassoio.6Per eseguire l’incubazi
• p7Raccomandazione: Una soluzione all’1% di soluzione di pulizia 7X (Flow Laboratories, 50 ml di concentrato in 5 litri di acqua calda).Rimuovere e s
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